携带间变性淋巴瘤激酶（ALK）基因重排的非小细胞肺癌（NSCLC）始终会产生对ALK酪氨酸激酶抑制剂（TKI）克唑替尼（赛可瑞）的耐药性。在此，我们报告了在克唑替尼耐药性方面，下一代ALK TKI色瑞替尼的首次临床前评价。询问对克唑替尼的获得性耐药的体外和体内模型，包括从对克唑替尼耐药的NSCLC患者的活组织检查中建立的细胞系，可以看出塞立替尼可以有效克服克唑替尼的耐药性突变。
 

　　特别是，色瑞替尼有效抑制具有L1196M，和S1206Y突变的ALK，而与ALK结合的色瑞替尼共晶体为这种增强的效力提供了结构基础。我们观察到，色瑞替尼不能克服两个对克唑替尼耐药的ALK突变G1202R和F1174C，并且在对色瑞替尼产生抗药性的患者的11例活检中，其中5个突变是其中之一。总的来说，我们的结果表明赛立替尼可以克服克唑替尼的耐药性，与临床数据表明赛瑞替尼在对克唑替尼耐药的患者中具有明显的疗效一致。
 

　　在3–7％的NSCLC中检测到ALK（间变性淋巴瘤激酶）的染色体重排。这些重排产生具有有效转化活性的组成性活性ALK融合蛋白。 ALK重排的肺癌对ALK酪氨酸激酶抑制高度敏感，强调了这样的观念，即这种癌症会沉迷于ALK激酶活性。根据早期研究，多靶酪氨酸激酶抑制剂（TKI）克唑替尼于2011年被FDA批准用于治疗患有ALK重排的晚期NSCLC患者。然而，尽管ALK重排的NSCLC有60％的高应答率，但大多数患者通常在1-2年内对克唑替尼产生耐药性。
 

　　对具有克唑替尼耐药性的ALK重排肺癌的研究已在大约三分之一的病例中鉴定出ALK融合基因扩增和继发性ALK酪氨酸激酶（TK）结构域突变。迄今为止，已在耐克唑替尼的患者中鉴定出七个不同的获得性耐药突变。最常见的二级突变是L1196M和G1269A。除这些突变外，在耐克唑替尼的癌症中也检测到1151Tins，和S1206Y突变（4、6-10）。在大约三分之一的耐克唑替尼的肿瘤中，有证据表明旁路信号通路被激活。在剩下的三分之一的克唑替尼耐药肿瘤中，耐药机制仍有待确定。
 

　　为了克服临床上对克唑替尼的耐药性，已经开发了与克唑替尼相比具有更高效价和选择性的下一代ALK抑制剂。我们先前评估了几种ALK TKI在具有不同ALK二级突变的模型中抑制ALK活性的能力。这些研究表明，对这些ALK抑制剂的敏感性取决于存在的特定抗性突变。例如，网守L1196M突变对TAE684，AP26113和ASP3026敏感，而1151T-ins对所有下一代ALK TKI产生抗性。 色瑞替尼是一种具有ATP竞争性，有效和选择性的下一代ALK抑制剂。已经在针对16种不同激酶的细胞增殖试验中测试了激酶的选择性，除ALK外，未观察到低于100nM的抑制作用。在ALK阳性NSCLC中的色瑞替尼的I期研究中，在克唑替尼复发患者和克唑替尼初治患者中均观察到显着的抗肿瘤活性。基于令人印象深刻的临床活动。
 

　　在此，我们提出了第一个报告，该报告检查了色瑞替尼在具有对克唑替尼的获得性耐药性的ALK阳性肺癌的临床前模型中的活性，以及对患者产生的色瑞替尼耐药性机制的早期生物学见解。体外酶学研究表明，色瑞替尼抗ALK的功效比克唑替尼高约20倍。同样，赛瑞替尼比克唑替尼对两种ALK重排的肺癌细胞H3122和H2228的作用更强。因此，色瑞替尼以比克唑替尼更低的剂量抑制了ALK磷酸化以及下游PI3K/AKT，MEK/ERK和mTOR信号通路。
 

　　为了进一步评估色瑞替尼的细胞特异性，我们确定了色瑞替尼对一组带有不同致癌驱动因子的肿瘤细胞系的GI50。 色瑞替尼对两种具ALK重排的肺癌细胞有效，而色瑞替尼对由GI50介导的KRAS，EGFR，PI3K或HER2驱动的NSCLC或乳腺癌细胞无效。