惊！细胞能储存，脐带血 NK 细胞长期冻存不影响扩增及抗肿瘤活性
McMaster 大学的研究人员发现，经过体外扩增的脐带血 NK 细胞可用于乳腺癌的治疗。
同时，长时间的冷冻保存并不会影响脐带血来源 NK 细胞的扩增能力和抗肿瘤活性。该成果发表在《Journal of Immunotherapy》杂志上。
脐带血是一种独特的生物资源，通常被保存在脐血库的深低温环境中，用于造血干细胞移植治疗血液系统疾病、免疫系统疾病、代谢疾病及儿童恶性实体瘤等。
McMaster 大学的 Ali Ashkar 教授认为，探索如何利用长期冷冻保存的脐带血，并了解其作为治疗产品的全部潜力，对于充分利用这份生物资源至关重要。
NK 细胞，又称自然杀伤细胞（Natural Killer Cells），是白细胞的一种。NK 细胞对杀灭肿瘤细胞和病毒感染的细胞非常重要。
NK 细胞抗肿瘤治疗主要有两种方法，一种是使用患者自己的 NK 细胞，另一种是使用别人的 NK 细胞。
而使用患者自己的 NK 细胞存在两个问题：
临床试验中常常使用的异体 NK 细胞来源有两种：健康志愿者捐献的 NK 细胞和脐带血来源的 NK 细胞。
相对于志愿者捐献，脐带血来源的 NK 细胞更加易于获得和制备，患者也不用等待过多时间。
因此，脐带血已被证明是治疗性 NK 细胞很有前途的无创性来源。
在本次研究中，研究人员从脐带血中分离并体外扩增了大量激活的 NK 细胞，然后观察这些 NK 细胞杀伤乳腺癌细胞的作用。
研究人员根据冻存时间长短，将脐带血分为三个组别：深低温冻存 1 - 10 年（长期组）、小于 1 年（短期组）与未冻存的脐带血。
结果显示，长期冷冻保存对脐带血 NK 细胞的扩增潜能和抗肿瘤活性都没有影响。同时，这些细胞在攻击原发性乳腺癌细胞时特别有效。
三种脐带血来源NK细胞的激活和成熟标记物表达相似
三种脐带血来源NK细胞分泌抗肿瘤细胞因子的比较
Ashkar 说：“我们证明了，可以从长期深低温保存的脐带血获得大量的 NK 细胞。这使得它成为推进 NK 细胞免疫治疗领域的一个可行的细胞来源，特别是当它用于乳腺癌时。”
该研究的第一作者，McMaster 医学院的学生 Tina Nham 说：“脐带血可以在出生时储存，以便在需要的时候用来帮助治疗孩子。当孩子长大后，脐带血可以继续保存，可用于免疫疗法治疗各种疾病。”
同样是关于脐带血来源 NK 细胞的研究，2017 年 6 月，MD Anderson 癌症中心开展了一项脐带血来源的嵌合抗原受体 NK 细胞（CAR - NK）临床研究，并首次进入人体试验 1/2 期阶段。这些 CAR - NK 细胞被用于治疗复发或耐药性慢性淋巴细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病或非霍奇金淋巴瘤，这一成果发表在知名学术期刊《Leukemia》上。
主持这一研究的 Katy Rezvani 教授说道：“NK 细胞是免疫系统中最有效的‘杀手’，但它们是‘短命鬼’。癌症细胞往往可以乘机逃避患者自身 NK 细胞的打击，病情进一步发展。”
通过使用病毒载体，研究人员将 CD19 CAR、IL - 15 基因和可诱导的基于半胱天冬酶 - 9 自杀基因转导入从脐带血获取的 NK 细胞，明显延长了实验小鼠的生存期。
CD19 是表达在某些血液癌细胞上的抗原，嵌合抗原受体相当于给 NK 细胞装上了 “制导导弹”；白细胞介素 15 可以增加 NK 细胞持续性、增强其活性；而自杀基因的导入是为了控制其毒性。
由此研究者得出结论，基因修饰脐带血来源的 NK 细胞为同种异体免疫治疗提供了一种容易制备、疗效惊人且安全性高的途径。
自 1988 年首例脐带血移植治疗范可尼贫血成功后，数以万计的临床移植数据已经证实了脐带血的价值。随着科学研究的进展，特别是再生医学、免疫细胞治疗技术的发展，脐带血的潜力还将进一步被科学家发掘。
同时，长时间的冷冻保存并不会影响脐带血来源 NK 细胞的扩增能力和抗肿瘤活性。该成果发表在《Journal of Immunotherapy》杂志上。
脐带血是一种独特的生物资源，通常被保存在脐血库的深低温环境中，用于造血干细胞移植治疗血液系统疾病、免疫系统疾病、代谢疾病及儿童恶性实体瘤等。
McMaster 大学的 Ali Ashkar 教授认为，探索如何利用长期冷冻保存的脐带血，并了解其作为治疗产品的全部潜力，对于充分利用这份生物资源至关重要。
一、脐带血来源的 NK 细胞
（一）NK 细胞简介
NK 细胞，又称自然杀伤细胞（Natural Killer Cells），是白细胞的一种。NK 细胞对杀灭肿瘤细胞和病毒感染的细胞非常重要。
（二）NK 细胞抗肿瘤治疗方法及问题
NK 细胞抗肿瘤治疗主要有两种方法，一种是使用患者自己的 NK 细胞，另一种是使用别人的 NK 细胞。
而使用患者自己的 NK 细胞存在两个问题：
- 肿瘤细胞有免疫逃逸机制，患者自己的 NK 细胞常常因被干扰而存在功能异常。
- 常规的化疗可能造成健康 NK 细胞采集数量不足。
（三）脐带血来源 NK 细胞的优势
临床试验中常常使用的异体 NK 细胞来源有两种：健康志愿者捐献的 NK 细胞和脐带血来源的 NK 细胞。
相对于志愿者捐献，脐带血来源的 NK 细胞更加易于获得和制备，患者也不用等待过多时间。
因此，脐带血已被证明是治疗性 NK 细胞很有前途的无创性来源。
二、长期冻存后的脐带血 NK 细胞
在本次研究中，研究人员从脐带血中分离并体外扩增了大量激活的 NK 细胞，然后观察这些 NK 细胞杀伤乳腺癌细胞的作用。
研究人员根据冻存时间长短，将脐带血分为三个组别：深低温冻存 1 - 10 年（长期组）、小于 1 年（短期组）与未冻存的脐带血。
结果显示，长期冷冻保存对脐带血 NK 细胞的扩增潜能和抗肿瘤活性都没有影响。同时，这些细胞在攻击原发性乳腺癌细胞时特别有效。
三种脐带血来源NK细胞的激活和成熟标记物表达相似
三种脐带血来源NK细胞分泌抗肿瘤细胞因子的比较
PMID: 29189387 DOI: 10.1097/CJI.0000000000000192
Ashkar 说：“我们证明了，可以从长期深低温保存的脐带血获得大量的 NK 细胞。这使得它成为推进 NK 细胞免疫治疗领域的一个可行的细胞来源，特别是当它用于乳腺癌时。”
该研究的第一作者，McMaster 医学院的学生 Tina Nham 说：“脐带血可以在出生时储存，以便在需要的时候用来帮助治疗孩子。当孩子长大后，脐带血可以继续保存，可用于免疫疗法治疗各种疾病。”
三、CAR - NK 技术的进展
同样是关于脐带血来源 NK 细胞的研究，2017 年 6 月，MD Anderson 癌症中心开展了一项脐带血来源的嵌合抗原受体 NK 细胞（CAR - NK）临床研究，并首次进入人体试验 1/2 期阶段。这些 CAR - NK 细胞被用于治疗复发或耐药性慢性淋巴细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病或非霍奇金淋巴瘤，这一成果发表在知名学术期刊《Leukemia》上。
主持这一研究的 Katy Rezvani 教授说道：“NK 细胞是免疫系统中最有效的‘杀手’，但它们是‘短命鬼’。癌症细胞往往可以乘机逃避患者自身 NK 细胞的打击，病情进一步发展。”
通过使用病毒载体，研究人员将 CD19 CAR、IL - 15 基因和可诱导的基于半胱天冬酶 - 9 自杀基因转导入从脐带血获取的 NK 细胞，明显延长了实验小鼠的生存期。
CD19 是表达在某些血液癌细胞上的抗原，嵌合抗原受体相当于给 NK 细胞装上了 “制导导弹”；白细胞介素 15 可以增加 NK 细胞持续性、增强其活性；而自杀基因的导入是为了控制其毒性。
由此研究者得出结论，基因修饰脐带血来源的 NK 细胞为同种异体免疫治疗提供了一种容易制备、疗效惊人且安全性高的途径。
四、寄语
自 1988 年首例脐带血移植治疗范可尼贫血成功后，数以万计的临床移植数据已经证实了脐带血的价值。随着科学研究的进展，特别是再生医学、免疫细胞治疗技术的发展，脐带血的潜力还将进一步被科学家发掘。